午夜精品三级视频福利-边接电话边叫床免费视频-国产美女无套内射免费视频-91国产熟女自拍视频

您的位置: 網站首頁 >> 技術文章 >> 質粒菌株產品操作說明

質粒菌株產品操作說明

更新日期: 2021-07-12
瀏覽人氣: 3344

一、擴增流程
收到產品后,請先根據產品管壁標簽來判斷產品形式,并在擴增前準確查找該質粒菌株的抗性、感受態和培養溫度。
1、質粒干粉(常溫運輸,存于-20度,90天保質期,請務必轉化挑單克隆培養,不要直接使用和測序)
①收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl ddH2O去離子水溶解質粒;
②取1支100μl 感受態于冰上解凍10min,加入2μl質粒,再冰浴30min后,42℃熱激60s,不要攪動,再冰浴2min;(從第二步開始均要在超凈工作臺中無菌操作)

③加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩37℃培養45min;
④6000rpm離心5min,僅留100μl上清液重懸細菌沉淀,并涂布至目標質粒抗性的LB平板上;(可使用本平臺的平板涂布專用玻璃珠進行涂布,可以比傳統涂布方法獲得更多轉化子)
⑤將平板正向培養1h,再倒置37℃培養14h。如果要求是30度則培養20h;
(菌落過多則將質粒稀釋后再轉化。沒有菌落則加入10μl質粒轉化。另不要直接轉表達感受態,要先轉克隆感受態,重提質粒后再導入表達感受態)

⑥挑取單菌落至LB液體培養基中,加入對應抗生素,220rpm震蕩培養14h,根據實驗需要和質粒提取試劑盒說明書提取質粒。
2、甘油菌種(冰袋運輸,存于-80℃,保質期90天,請務必劃線挑單克隆培養)
四區劃線后挑單菌落培養,酵母菌需要先液體復蘇再四區劃線,再挑單菌落液體培養。
3、穿刺菌種(冰袋運輸,存于4℃,保質期7天)
穿刺接種,液體培養后四區劃線,再挑單菌落液體培養。
4、菌落平板(冰袋運輸,存于4℃,保質期7天)
直接挑取單菌落至液體培養基中。

5、液體質粒(冰袋運輸,存于-20℃,保質期90天)
單獨提取的液體質粒收到后可直接使用。
6、濾紙質粒(常溫運輸,存于-20度,90天保質期,請務必轉化挑單克隆培養,不要直接使用和測序)
收到貨后將濾紙畫圈部分剪下放入EP管中,加100ul無菌水將濾紙浸濕并浸泡5min,吸取5ul質粒轉化,離心全涂。



二、轉化圖片

分享到:
版權所有©2019 上海晅科生物科技有限公司 備案號:滬ICP備19006485號-1
  • 掃一掃,關注我們

主站蜘蛛池模板: 亚洲国产日韩欧美在线| 国产精品麻豆一区二区在线观看| av解说一区二区在线| 色一情一乱一区二区三区啪| 欧美亚洲中文字幕第一页| 亚洲av无一区二区二三区| 国产三级欧美三级日韩三级| 亚洲欧洲中文字幕一区| 91精品国产一区二区三| 日韩成人久久久精品视频| 人妻人人澡人人添人人爽av| 欧美久久久久久久久丰满| 欧美一级黄色高清视频| 国产精品久久精品视频| 日韩熟女熟妇久久精品综合| 国产日韩av一区二区在线观看| 麻豆精品传媒成人精品| 日韩久久蜜臀系列一区二区三区| 国产三级欧美三级日韩三级| 欧美精产国品一二三产品免费观看 | 日本成片视频中文字幕| 午夜麻豆一区二区在线观看 | av国产在线精品国自产在线| 久久久久久精彩人妻一区| 亚洲精品一区在线观看| 亚洲国产午夜精品理论片无| 国产精品大尺度激情视频| 国产精品久久精品中文| 一区二区中文字幕在线视频 | 中国精品人妻久久久久| 欧美一区二区三区裸体| 国产欧美日韩在线精品一二区| 欧美三级中文字幕久久精品| 日韩性视频日韩性视频| 韩国视频一区二区在线观看| 粉嫩国产精品一区二区| 久久只有这里有精品热久久| 精品香蕉一区二区三区| 人妻熟妇乱又乱精品视频| 天天日天天干成人网| 日韩美女福利视频网站一区|